ترسیب پروتئینها salting out
جهت كاهش حجم و تغليظ و تخلیص پروتئينها، از روشهای مختلف رسوب دهی مانند رسوب دهی به وسيله نمك، حلالهای آلی و حلال های پليمری استفاده میشود.
رسوبدهی به وسيله نمك
روش عمومی براي انجام عمل رسوبدهی استفاده از نمك است كه با افزايش مقدار نمك حلاليت پروتئينی كم شده و به هم پیوسته و رسوب میکند. قدرت رسوبدهی نمكها، به صورت ذرات آنيوني و كاتيون در زیر نشان داده شده است.
Anions: Po43-, So42-, CH3Coo-, Cl-, Br-, No3-, Clo3-, I-, SCN
Cations: NH4+, K+, Na+, gunidine Cl(CH2)3
از طريق هيدراتهشدن یونهای مثبت و منفی نمك افزوده شده در محلول و دور كردن مولكولهای آب از سطوح هيدروفوب پروتئينها و درنتيجه اين سطوح هيدروفوب به هم پيوسته و رسوب مینمایند.
رسوبدهی به وسيله حلالهای آلی
با افزايش حلال آلی، قدرت حلاليت مولكولهای باردار آب دوست پروتئينها در محيط آبی كم شده و باعث به هم پيوستن ذرات مولكولی و رسوبدهی آنها میشود (مانند مكانيزم رسوبدهی پروتئينها در نقطه ايزوالكتريك، در غلظتهای پايين نمك). به عنوان مثال اتانل، در جداسازی پروتئينهای پلاسمایی بسيار مورد استفاده قرار ميگيرد.
رسوب دهی به وسيله پليمرهای آلي
این روش، مانند روش استفاده از حلال آلی و از طريق كاهش فعاليت محيط آبی است. به عنوان مثال Poly Ethylen Glycol، در جداسازی پروتئينهاِی پلاسمایی، فراوان مورد استفاده قرار ميگيرد.
به دنیای گسترده علوم آزمایشگاهی ایران خوش آمدید